牙周炎伴糖尿病表达水平

　　合并糖尿病的慢性牙周炎患者龈沟液中基质金属蛋白酶9(matrixmetalloproteinases-9，MMP-9)的表达水平改变。方法:以2019年3月～9月就诊于我科的慢性牙周炎患者为研究对象，其中慢性牙周炎合并糖尿病患者(实验组A)，牙周健康伴有糖尿病患者(实验组B)，慢性牙周炎不合并糖尿病患者(对照组A)以及牙周健康组患者(对照组B)各150例。使用酶联免疫吸附测定法实验室测量MMP-9的表达水平。结果:慢性牙周炎合并糖尿病患者龈沟液中MMP-9表达水平最高，慢性牙周炎不合并糖尿病患者次之，牙周健康伴有糖尿病患者再次之，牙周健康组龈沟液中MMP-9表达水平最低。结论:合并糖尿病后慢性牙周炎患者龈沟液中MMP-9的分泌增加，从而促进牙周炎的进展。

　　［关键词］牙周炎;糖尿病;基质金属蛋白酶9

　　牙周炎是由菌斑微生物引起的慢性感染性疾病，是导致成年人牙齿缺失的首要原因，发病率高达40%～60%［1］。糖尿病是最常见的慢性疾病之一，糖尿病患者机体免疫力常常降低并伴发多种其他慢性疾病，牙周炎即是其中的一种［2］。糖尿病合并牙周炎患者主要表现为牙齿松动、移位，咀嚼功能下降。基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases，MMPs)是牙周结缔组织组织破坏的主要蛋白溶解酶，正常生理状态下MMPs可以参与到结缔组织的改建和愈合［3］。但在牙周炎等病理状态时，在牙周微环境抗原因子和炎性因子等刺激状态下，MMPs由中性多核白细胞及其他牙周膜细胞分泌增加，MMP-9等基质金属蛋白酶可以降解牙龈、牙周膜和牙槽骨的细胞外基质［4］。本文将分析合并糖尿病的牙周炎患者龈沟液中MMP-9含量变化。

　　资料和方法

　　1实验对象

　　选取2019年3月～9月就诊于华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心牙周科的300例慢性牙周炎患者为研究对象，男164例，女136例，年龄范围18～70岁。本研究经伦理委员会批准进行，所有对象均签署知情同意书。纳入标准:①参照牙周炎诊断标准:牙周附着丧失并形成牙周袋，牙龈炎症，牙槽骨吸收，牙齿松动等症状［5］;②1周内重复测试2次空腹胰岛素水平均＞5.5μIU/mL，空腹血糖值＞6.8mmol/L诊断为糖尿病［6］。同时选取就诊于我院的牙周健康者300例作为对照组，男175例，女125例，年龄范围18～70岁。

　　2分组

　　对照组300例，分为对照组A和对照组B，每组各150例。对照组A:牙周健康且不合并糖尿病者150例，对照组B:牙周健康但伴有糖尿病者150例;龈沟探诊深度≤2mm，龈沟探诊未见出血，未见明显牙龈退缩，均取下颌第一磨牙作为观察对象。实验组300例，分为实验组A和实验组B，每组各150例。实验组A:慢性牙周炎合并糖尿病者150例，实验组B:慢性牙周炎不合并糖尿病者150例。龈沟探诊深度≥5mm，龈沟探诊可见出血，牙龈退缩明显，均取下颌第一磨牙作为观察对象。

　　3牙周探诊及牙周指标

　　所有患者在检测前均未进行牙周治疗，均选取下颌第一磨牙为检测对象，均检测6个位点(颊侧近中、中央、远中及舌侧近中、中央、远中)。3.1牙周探诊深度(periodontaldepth，PD)健康牙龈的龈沟探诊深度不超过2～3mm，指龈缘至袋底或龈沟底的距离，在健康状态下探针可进入结合上皮，有炎症时探针会超过结合上皮。3.2附着丧失(attachmentloss，AL)袋(沟)底至釉牙骨质界的距离，也称临床附着水平，将探诊深度减釉牙骨质界至龈缘的距离;若有牙龈退缩，则是将探诊深度加上龈退缩的距离。3.3出血指数(bleedingonprobing，BOP)将钝头牙周探针轻探入龈沟或牙周袋中，取出探针后30s，观察有无出血和出血程度，分为0:牙龈健康无炎性颜色，1:有炎性改变，2:探诊不出血，3:探诊点状出血，4:沿着牙龈扩散并溢出，5:自动出血。探诊出血这一指标不能作为病情进展的指标，探诊后不出血却可以作为牙周组织处于稳定阶段的较好指标。若多数部位都存在探诊出血，可以预示有可能附着丧失在进展，是附着丧失加重的重要危险指标之一。

　　4龈沟液(gingivalcrevicularfluid，GCF)采集和基质金属蛋白酶-9检测

　　将龈沟液取样试纸(Whatman公司，英国)裁成2mm×8mm大小并称重，将滤纸插入龈沟，60s后取出并再次称重，质量的差值即为龈沟液重量，再用相对质量浓度将其换算为体积。放入离心管，加入PBS缓冲液1mL，静置1h后震荡后离心，取上清液密封，放置于－80℃冻存待测。解冻上清液，用ELISA试剂盒(Ｒ＆D公司，美国)检测MMP-9的含量。

　　5统计学方法

　　应用SPSS18.0统计软件进行统计学分析，数据以(x珋±s)表示，组间比较行t检验，检验水准α=0.05，P＜0.05表示差异有统计学意义结果实验组和对照组的牙周相关指标分析显示，合并糖尿病患者的牙周炎进展更加显著，MMP-9含量更高(P＜0.05)(表1)。

　　讨论

　　糖尿病是老年人群中最常见的慢性疾病之一，其主要特征为血糖水平高且不稳定，糖尿病患者常伴有多饮、多尿、消瘦的临床表现［1］。慢性牙周炎是由菌斑微生物导致的牙周组织慢性感染性疾病，在我国成年人中发病率高达40%～60%，牙周炎患者通常由于咀嚼功能降低而导致生活质量下降［2］。流行病学调查显示，在成年糖尿病患者群体中，同时患有牙周病的概率呈现为和逐渐上升趋势，血糖水平越高的患者，其牙周组织破坏也越严重［3］。MMPs是一类蛋白重要的水解类酶，存在于许多细胞以及细胞外基质中，主要作用是水解细胞外基质［4］。基质金属蛋白酶组织抑制剂系列酶至今已发现19种，这类酶主要功能是分解细胞外基质，可以参与到人体许多生理和病理过程在慢性牙周炎中，MMPs的活性可以用来提示牙周炎症的严重程度，其中，MMP-1、MMP-9、MMP-14、MMP-8以及MMP-13均被报道与牙周破坏相关［7］。有研究比较了患有Ⅱ型糖尿病的牙周炎患者的唾液中MMP-8水平，结果显示合并糖尿病组的牙周炎患者的MMP-8水平显著高于未合并糖尿病组患者［8］。上述研究同时还发现2型糖尿病合并慢性牙周炎患者血清中Toll样受体4(Toll-likereceptor4，TLＲ4)、髓样分化因子88(myeloiddifferentiationfactor88，MyD88)、肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor-α，TNF-α)、白介素-1β(interleukins-1β，IL-1β)和IL-6水平升高，TLＲ4/MyD88信号通路介导的炎症反应可能参与了该病的发生及病情进展，但该研究并未直接在慢性牙周炎的发病部位-牙周袋中检测相关标志物的表达情况。MMP-9是人体内最重要的基质金属蛋白酶之一，广泛参与人体许多生理及病理过程，并在牙周炎发生发展过程中也起着重要作用［5］。MMP-9水平与牙周状况的关系近年来逐渐受到关注［9-11］。MMP-9水平较牙周治疗前显著降低，同时均显著高于正常对照组中MMP-9总量［12］。但关于牙周炎合并糖尿病患者的龈沟液中MMPs的含量是否具有差异还不得而知。本研究将慢性牙周炎，牙周健康合并或者不合并糖尿病者进行对比研究，酶联免疫吸附测定法检测患者龈沟液中MMP-9的表达水平。结果显示慢性牙周炎合并糖尿病患者龈沟液中MMP-9表达水平最高，慢性牙周炎不合并糖尿病患者次之，牙周健康伴有糖尿病患者再次之，牙周健康组患者龈沟液中MMP-9表达水平最低。合并糖尿病的慢性牙周炎患者MMP-9表达量显著升高，提示合并糖尿病的患者牙周破坏程度有可能更加严重。综上所述，在给予重度牙周炎伴糖尿病患者牙周治疗的同时采取抑制MMP-9的表达，可为牙周炎合并糖尿病患者的临床治疗提供一定的指导意义。

　　作者：王媛媛 马威 陈娟